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热证大鼠模型肝脏组织中腺苷酸含量的测定

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热证大鼠模型肝脏组织中腺苷酸含量的测定
时间:2023-08-28 00:50:27     小编:

摘要:通过灌胃正常大鼠甲状腺素片(含T3,T4)制造热证大鼠模型,正常大鼠给药7 d,采用RP―HPLC法检测大鼠肝脏组织中的ATP、ADP,AMP含量。结果表明。热证大鼠模型肝脏组织中腺苷酸含量与正常大鼠比较有显著差异。本方法简单,结果准确,验证了热证大鼠模型能量代谢加快。

关键词:反相高效液相色谱法;大鼠;肝脏;腺苷酸

中图分类号:0657.7+;R36 文献标识码:A 文章编号:0439-8114(2010)04-0954-02

甲状腺激素在体内具有广泛的生理作用,其中最主要的是促进组织氧化及产热。以往的研究表明。热证机体代谢旺盛。为探讨热证与机体能量的关系,我们采取灌胃正常大鼠甲状腺素片的方法制造热证大鼠模型,测定大鼠肝脏中腺苷酸含量,并与对照组比较。探讨热证机体与能量代谢的关系。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1仪器LC―10ATVP高效液相色谱仪:SPD-10AVP紫外可见分光检测器:Chromato―solutionlight色谱工作站;AUerge 64R型高速冷冻离心机;手动玻璃匀浆器:C0250型超声波清洗器。

1.1.2 试剂 ATPNa2、ADPNa2、AMPNa2对照品由Sigma公司提供,进口分装,纯度≥98%,批号为070601:磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、高氯酸均为分析纯(广东汕头市西陇化工厂);甲醇为色谱纯(国药集团化学试剂有限公司):试验用水为娃哈哈纯净水;液氮由南昌生化试剂厂提供。

1.1.3动物与药品 成年健康SD大鼠32只,雌雄各半,体重(200±20)g。由江西中医学院实验动物中心提供。甲状腺素片,含药量(T3,T4)为40 mg,批号为070302(浙江尖峰药业有限公司)。

1.2方法

1.2.1 热证大鼠模型制造方法健康SD大鼠32只,随机分成两组,第一组为正常对照组(雌雄各半),灌胃给药0.5%CMC-Na;第二组为热证大鼠模型给药组(雌雄各半),灌胃给予甲状腺素片50mg/(kg・d),甲状腺素片以0.5%CMC―Na配制成所需浓度的混悬液。两组连续给药7 d,每天一次。光照:黑夜=12h:12 h,温度:(25+1)℃,湿度:(55+5)%。

1.2.2大鼠肝脏组织样品处理大鼠断头处死,迅速取肝脏组织于液氮中保存,测定时称取0-3 g肝脏组织于玻璃匀浆器中,加入3 mL预冷的0.6 mol,L高氯酸,在冰水浴中迅速制成匀浆液。匀浆液4℃、8 000 r/min离心10 min。精密取上清液1 mL,用1 mol/L的磷酸氢二钾0.7 mL中和至pH值6.5左右。再4℃、8 000 r/min离心10min。取上清液经0.45 tJ,m滤膜过滤。即得肝脏组织样品溶液。1.2.3 RP-HPLC分析条件Hvpersil C18色谱柱(4.6mmx250mm,5μm);C18预柱;流动相为pH值6.0的75 mmol/L KH2P04-K2HP04缓冲溶液;流速为0.7 mL/mln;柱温为25℃:检测波长为254nm;灵敏度为0.01AUFS;进样量为10μL。

2 结果与分析

2.1定性试验

精密称定对照品ATP 5.0 mg、ADP 6.0 mg、AMP 4.0mg,置于同一50mL容量瓶中,用流动相溶解并定容,摇匀,配制成腺苷酸混合对照品溶液。精密称取对照品ATP 12.4 mg、ADP 9.8 mg、AMP 6.2mg,分别置于50 mL容量瓶中,用流动相溶解并定容,摇匀,ATP、ADP、AMP浓度依次为248μg/mL、196μg/mL、124μg/mL,作为储备液,置4~C冰箱保存。测定时取经处理后的肝脏组织样品在上述色谱条件下进样10μL作色谱分析,ATP、ADP、AMP保留时间分别为7.3、8.5、14.3 min,峰形良好,无杂质峰干扰测定。定性结果如图1。

2.2线性关系

回归分析结果表明ATP在1.575~252 txg/mL范围内.ADP在1.275-204 μg/mL范围内,AMP在1.325-212μg/mL范围内,线性关系良好。相关系数分别为0.999 8、0.999 3、0.999 4。ATP、ADP、AMP的回归方程分别为:A=8.176xl(PC-4.928x103;A=1.033x104C-2.815xl(P;A=1.631x104C-5.259x104。

2.3精密度试验

在上述色谱条件下.精密吸取腺苷酸混合对照品溶液,在同一天连续进样6次,测定ATP、ADP、AMP的峰面积,其RSD分别为2.0%、2.6%、2.0%。

2.4加标回收率试验

称取大鼠肝脏组织1.2 g,平均分成4份。一份作本底值,另外3份加入标准品,计算加标回收率。肝脏组织平均加标回收率如下:ATP为95.2%.ADP为94.5%,AMP为93.6%。

2.5肝脏组织中ATP、ADP、AMP含量变化

根据上述方法测定大鼠肝脏组织中ATP、ADP、AMP的含量。结果表明与对照组比较,热证大鼠模型给药组ATP、ADP、AMP含量均有提高,且有显著性差异(P

3 小结

试验数据表明热证大鼠模型给药组的ATP、ADP、AMP含量均高于正常对照组且具有显著性差异(P

据文献报道,在甲状腺激素作用下,机体物质代谢增加,相应的能量代谢也会增加,一般直接反应就是体温升高,体重下降,饮水增多,生理状态下,机体的寒热可反映能量生成及利用的平衡关系,其中主要是ATP的生成、利用及产热作用,故对热体中ATP活性高低的研究及其他指标含量的比较研究可从一方面反映热证与能量代谢的关系。

本试验采用RP-HPLC法测定大鼠肝脏组织中腺苷酸含量,操作简单,快速,重现性好,定性可靠。定量准确。本试验研究表明甲状腺激素可以提高机体的能量代谢,制造的热证大鼠模型能量代谢水平有加快的趋势,有关热证大鼠模型与能量代谢的作用机理及其能量代谢指标的选择有待进一步研究。

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植物油中的酸价越高,说明油脂发生了劣变,其营养价值也就越低,在食用后对人体的正常消化功能可能造成一定的影响,严重劣变的植物油还会含有对人体有害的物质,不仅影响到了食品的口感,也对人体健康产生的一定危害。所以,酸价能有效......
少腹逐瘀汤对气虚血瘀模型大鼠红细胞膜组分的影响研究
发布时间:2023-01-23
少腹逐瘀汤亦出自王清任《医林改错》,王氏治疗血瘀常用桃仁、红花、赤芍、当归、川芎等辛温或辛而微温之品。以温为主少用药性偏凉的活血祛瘀药物,体现王氏治疗瘀血偏于温散的特点,这与中医认为血属阴,得温则行,得寒则凝的思想有关......
简析一种血虚证小鼠模型的制备方法及评价
发布时间:2023-07-12
血虚是体内阴血亏损的病理现象,可由失血过多,或久病阴血虚耗,或脾胃功能失常,水谷精微不能化生血液等所致。李东垣在《脾胃论饮食劳倦所伤始为热中论》云:有所劳倦,行气衰少,谷气不盛,上焦不行,下脘不通,胃气热,热气熏胸中,......
大数据环境下网络稳定性测试模型研究
发布时间:2015-09-09
摘 要: 传统的计算机网络稳定性分析模型受制于大数据环境下的随机性、突发性、有限性等弊端,分析结果偏差较大。提出基于模糊层次以及主元分析的大数据环境下网络稳定性测量模型,通过构建符合大数据环境下的网络稳定性评价指标体系......
论油田采油助剂有机氯含量测定的几个要点
发布时间:2023-07-28
摘 要:在油田开采的过程中需要使用采油助剂,能大大提高采油的效率。通过实际检测可以发现采油助剂中含有不定量的有机氯,为了能够准确地检测其含量,就需要采取一些科学的方法,但是在使用这些方法的过程中需要遵从几个要点。文章主......
野外饱和土浆法快速测定土壤含盐量的研究
发布时间:2023-04-29
摘 要:研究了在天津滨海盐渍土壤上,野外现场采用饱和土浆法快速测定的土壤电导率与质量法测定的土壤含盐量之间的关系。通过对160个不同类型盐渍化土壤样品的分析表明:野外饱和土浆法与土壤全盐量之间呈现分段极显著正相关关系,并......
谈小剂量辣椒素对大鼠内脏机械及化学刺激敏感性的影响
发布时间:2023-04-14
近年来,功能性胃肠病(functional gastrointestinaldisorders, FGIDs) 的发病率正逐年上升, 但其发病机制仍不清楚, 大量研究显示内脏高敏感在FGIDs 发病机制中有着关键作用。随着辣椒素(capsaicin, Cap) 缓解疼痛的作用被逐渐认识......
乳腺癌组织中paxillin和c-erbB-2的表达及临床意义
发布时间:2022-10-15
毕业论文 作者:张彦武 常庆龙 冯爱强 贾国丛 吴亚群 【关键词】 乳腺肿瘤·paxillin蛋白·受体,c-erbB-2·预后 Expression and clinical significance of paxillin and c-erbB-2 in human breast carcinoma 【KEY WORDS】 B......
掌控乾坤 32款主流游戏鼠标大型横向评测
发布时间:2023-06-29
在游戏中,得到了神器级装备就能纵横天下,所向无敌;而在游戏之外,你又如何操控你的神级人物纵横天下?游戏鼠标,作为你的掌中游戏利器,毫无疑问是助你纵横游戏乾坤的最锋利的那一把刀。只有拿着自己最趁手的武器,才能笑做游戏世界。想要掌握“乾坤”,谁又会成为你掌中的那一把利刀?32款游戏鼠标大型横向测试,伴你驰骋游戏世界的伙伴,或许就在其中。伴随电子竞技市场的持续火爆以及游戏直播收视率的不断攀升,电竞外设也.........
CT在肝脏损伤中的诊断应用研究
发布时间:2023-03-29
[关键词] CT扫描;肝脏损伤;诊断;漏诊 1 资料与方法 1.1 一般资料 1.3 统计学方法 2 结果 2.1 CT扫描影像学表现 2.2 漏诊率情况 3 讨论 肝脏是人体中一个十分重要的实质功能脏器,常因弹性较差而易损伤,多由交通事......
肝胆湿热型痤疮的临床医学治疗
发布时间:2022-12-03
毕业论文 【关键词】 肝胆湿热 痤疮 中医治疗 寻常痤疮是一种反复发作,难以彻底治愈的皮肤病。传统理论多从肺、胃、脾辨治,常用分型治疗为:肺经风热型用枇杷清肺饮疏风清肺,肠胃湿热型用茵陈蒿汤加减清热化湿通腑,脾失健运型用......
浅谈铋磷钼蓝分光光度法测定钒钛磁铁矿中磷含量
发布时间:2023-01-19
1前言 钒钛磁铁矿是一种含多种有益伴生元素并可被综合利用的重要矿石。有用组分为铁、钛、钒、钴、镍、铌、钽、稀土等,而磷却是有害杂质之一。矿石中磷含量的高低对炼铁、炼钢都有较大影响,因此,准确测定钒钛磁铁矿中磷含量有着重要意......
几种常见品种葡萄籽及葡萄皮中原花青素含量测定
发布时间:2023-07-20
摘要采集市场上几种常见的有籽葡萄及无籽葡萄品种样本,采用有机溶剂提取法进行原花青素的提取,利用铁盐催化比色法测定葡萄籽及葡萄皮中原花青素的含量。结果显示在有籽葡萄中,黑加仑葡萄籽及葡萄皮原花青素含量是所有葡萄中最高的,分e为葡萄籽中232.1mg/g,葡萄皮中125.5mg/g;在无籽葡萄中,葡萄皮原花青素含量最高的品种为黑提,为51.9mg/g。本研究结果为原花青素食品和保健品的开发提供了实验依.........
玉米须对2型糖尿病模型大鼠降糖机制讨论
发布时间:2016-12-20
玉米须是禾本科玉蜀黍属植物玉米stigma maydis L.的花柱和柱头,含有甾醇、多糖、皂苷、黄酮等化学成分,具有降血糖、抗氧化、抗肿瘤及免疫调节等作用,民间常以玉米须做药茶用于糖尿病、高血压病的辅助治疗。目前,玉米须的降糖机制研......
GC―MS测定白酒中3种邻苯二甲酸酯
发布时间:2023-07-26
摘要:建立了白酒中3种邻苯二甲酸酯类的GC-MS分析方法,通过比较不同的前处理方法,确定白酒的提取方法,同时确定质谱条件。试验表明:方法检出限0.05 mg/kg,相关系数大于0.998,线性范围为0.05~5mg/kg,高中低浓度添加回收率为84-......
试论智慧型组织
发布时间:2022-10-26
当今世界瞬息万变,科技进步和知识更新速率加快,不确定因素加速了世界政治、经济、生态环境迅速变化。 智慧型组织的提出为任何一种组织在这样的环境中生存乃至发展,提供了一种可供借鉴的模式。因为智慧是一种对事物能迅速、灵活、正......
某型“三代”核电机组与M310机组堆芯测量系统
发布时间:2015-09-11
摘 要 文章从总体上介绍了“二代+”商用核电站M310机组及某型“三代”核电机组堆芯测量系统。描述了堆芯测量系统的中子通量测量、温度测量、水位测量三大主要功能,介绍了系统内主设备的原理及性能参数。从堆型特点、系统布置、功能、......
山药多糖对Ⅰ型糖尿病大鼠血糖血脂及肝肾氧化应激的反应
发布时间:2023-07-21
0 引言 山药( Rhizoma Dioscoreae) 是我国传统中药,别名怀山药、土薯、山薯、山芋等,其营养丰富,具有补脾养胃,生津益肺,补肾涩精等很重要的保健与药用价值. 山药的化学成分主要有山药粘液质、山药多糖、淀粉、氨基酸、脂肪酸、微......
谈火焰原子吸收光谱法测定不同品种甘草中钙、锌的含量
发布时间:2022-12-10
甘草系豆科(Leguminosae)甘草属(Glycyrrhiza L.)多年生草本植物,是中国2000 多种草药中用量最大的一种传统中药材,具有调和诸药、益气补脾、祛痰止咳、清热解毒、预防癌症等功效。现代研究认为,甘草含有多种三萜类化合物、黄酮类化合......
高效液相色谱法测定植物油中叔丁基对苯二酚的含量研究
发布时间:2022-09-08
叔丁基对苯二酚(TBHQ)又名叔丁基氢醌、特丁基对苯二酚,是一种酚类脂溶性抗氧化剂。抗氧化剂是指能防止食品成分因氧化而导致变质的一类添加剂,主要用于防止油脂及富脂食品的氧化酸败,以及由氧化所导致的褪色、褐变以及维生素被破坏等......
去组织,自组织,云组织
发布时间:2022-09-06
如果市场这么美好,为什么我们还需要组织?为什么不能在市场中进行所有的价值交换?互联网发展到今天,新技术、社会化媒体、大规模业余化,使得群体的连接成本大幅下降。交易成本巨幅下降,使得去组织化成为可能。在今天这个时代,大公司为什么必然会衰败?基业常青为什么将不复存在?因为《基业常青》这本书讲的是工业时代,而我们已经进入一个颠覆式生存的时代,工业时代的思维方式、商业逻辑已然失效。我坚定地认为,如果你从产.........
探讨两种带蒂组织瓣在腮腺区缺损修复中的应用
发布时间:2023-04-05
关键词:带蒂组织瓣;颏下动脉岛状皮瓣;腮腺区肿瘤;修复 1 资料与方法 1.1一般资料 ①颏下岛状动脉皮瓣的制备:根据组织缺损大小在颏下正中处开始设计皮瓣,该皮瓣两侧界不能超过胸锁乳突肌前缘,其上界紧沿着下颌骨下缘,下界......
离子色谱―串联质谱法测定牛奶中氯酸盐和亚氯酸盐
发布时间:2022-11-20
牛奶在加工包装过程中涉及各种器皿的清洗和消毒,亚氯酸盐和氯酸盐作为对人身体健康有害的物质,很可能趁机潜入并存在于成品牛奶产品中,因此有必要对牛奶中的亚氯酸盐和氯酸盐进行检测。消毒剂副产物(disinfection by-products,DB......
谈不同构建方法对肾阳虚大鼠模型的影响
发布时间:2022-10-14
肾阳虚大鼠模型是研究中医阴阳学说和补阳药物作用机制的重要手段,它需要符合中医肾阳虚典型症状,如精神萎顿、体毛干枯不齐、反映迟钝等。历来建模方法各式各样,然缺乏比较分析,不同建模方法对大鼠的病理生化产生不同的影响,如腺嘌......
HPLC法测定左卡尼汀注射液的含量及有关物质的研究
发布时间:2022-08-29
左卡尼汀是一种氨基酸衍生物,又称左旋肉碱,是哺乳动物能量代谢必需的体内天然物质,其作用主要为促进脂质代谢。左卡尼汀注射液在临床上应用广泛,效果良好,是治疗心力衰竭的首选药物,主要用于慢性肾衰竭及血液透析者肉碱缺乏性疾病......
血必净对大鼠急性胰腺炎保护作用机制探讨
发布时间:2023-04-21
【摘要】 目的 探讨血必净对大鼠急性胰腺炎的保护作用及机制。方法 SD大鼠48只, 随机分为假手术组、胰腺炎组和治疗组,每组再分为4 h、8 h亚组。假手术组仅行开关腹手术,胰腺炎组以牛磺胆酸钠造模,治疗组以血必净干预。光镜观察胰腺组......
肝脏上有囊肿是怎么回事
发布时间:2023-05-07
湖北读者罗某来信说:我是一名45岁的女性,在最近一次体检中,做B超时发现右边肝脏有一个囊肿。体检医生告诉我,肝脏囊肿是一种较为常见的肝脏良性疾病,不必顾虑,只要定期复查B超就可以了。虽然我现在没有任何症状,但仍然很担心,......
固定翼模型起落架组装小窍门
发布时间:2023-04-19
如今小型电动固定翼特技模型飞机的套材种类很多。有的厂家为了降低成本,配备的附件档次较低。以尾轮转向机构为例,有的直接被粘在方向舵上,有的被插在方向舵舵面里。其实尾轮机构对模型飞机飞行安全至关重要,尤其在起飞降落的滑跑中,基本上得靠操纵它来稳定方向。质量差的尾轮机构会严重影响滑跑稳定性、威胁飞行安全。若厂家提供的配件不合格,爱好者如何利用现有材料进行改进?在此推荐一个解决方法。如果是需要将摇臂钢丝插.........
产品销量模型在商品扩散预测中的应用
发布时间:2022-10-29
摘要:预测产品扩散要参照国内外相关的理论和应用成果,针对S曲线增长模型在预测产品扩散实际应用中出现的问题,进行较为深入地剖析,在找出解决办法的基础上,才能构建出运用S曲线增长模型预测产品扩散的实务性流程。 关键词:产品扩散;S......
台州新型城镇化背景下的社区志愿者组织模型
发布时间:2022-11-17
摘要:随着我国改革开放的进一步深化,我国的工业化和城镇化发展也取得了阶段性成果。为了实现经济、社会与环境和谐发展,台州市积极成立志愿者组织,以加强社区党群组织为重点,在保障和服务民生、促进社区和谐中发挥了重要作用。 ......
石灰石中氧化钙含量检测方法的探究
发布时间:2023-01-28
摘 要:在采用盐酸直溶法测定石灰中氧化钙含量的实验中,比较了不同溶解温度对结果的影响;同时比较了不同指示剂的灵敏度及其用量对实验结果的影响。结果表明,最佳的溶解温度为95-105℃;羟基萘酚蓝的最佳用量为0.001g-0.01g;用适量......
制定社会组织基本法
发布时间:2016-04-08
论文对绝大多数的朋友们来说是必不可少的,为了让朋友们都能顺利的编写出所需的论文,论文频道小编专门编辑了“制定社会组织基本法”,希望可以助朋友们一臂之力! 自建国以来,我国一直没有调整社会组织的法律法规,社会组织的活动长......
实时超声造影在肝脏疾病诊断中的应用
发布时间:2022-10-22
毕业论文 【关键词】 超声 近年来,随着超声造影技术的发展和新型超声造影剂的面市,超声造影在肝脏疾病诊断中得到较广泛的应用,并取得了长足的进步[1]。 1 实时超声造影的特点 2 实时超声造影在肝脏疾病诊断中的应......
如何做好大气环境监测的质量保证
发布时间:2022-11-28
一、大气环境监测 大气环境质量是指在一个具体的大气环境内,大气质量的总体或某些要素对人群的生存和繁衍以及社会经济发展的适宜程度。大气环境监测是指间断或连续地测定大气环境中污染物的种类、浓度、观察分析器变化及对大气环境影......
支持Web服务组合与验证的形式化模型
发布时间:2023-03-10
摘要:针对Web服务的组合与验证问题,在范畴理论描述框架的基础上,引入进程代数描述服务组件的外部行为,为Web服务系统的架构描述建立了一种形式化的语义模型。Web服务作为范畴理论中的对象节点,服务间的交互和组合关系作为态射,从......
信阳地区常见食用菌重金属含量的测定及安全性评价
发布时间:2023-07-07
摘要:对信阳地区市售鲜食用菌香菇、黑木耳、银耳样品中的铅、镉、汞、砷含量进行检测,并结合国家卫生质量标准(GB7096-2014)及食用菌行业标准(NY749-2012)对被测食用菌的重金属含量进行安全评价。结果表明,信阳地区市售食用菌的重金属含量总体上是安全的。关键词:食用菌重金属评价测定中图分类号:S646文献标识码:A文章编号:1672-3791(2015)07(a)-0236-02食用菌口.........
大型水轮机组综合测试系统研制
发布时间:2022-10-23
摘 要:伴随着经济高速发展,先前的大型水轮机组综合测试系统显然不再满足人们的需要。我国众多座百万级大型水电厂靠着在实践中不断探索与改正,成功地研制出了多高精度、多功能的大型水轮机组多功能综合计算机测试系统,为实行水轮机......
施工组织设计中劳动力测算方法
发布时间:2022-12-07
摘 要:在施工组织设计中,工、料、机等资源需求的计算是整个设计过程的基础,而劳动力的计算尤其重要,没有准确的劳动力数量,而施工组织只能是“纸上谈兵”,劳动力数量既不靠经验估算,也不能将概算中人工数进行简单的相加,因为施工......
含制度、技术因素的农业经济增长模型及实证分析
发布时间:2014-01-07
一、引言 土地、资本、劳动力是 影响 农业 经济 增长的三大物质要素,而技术进步则是经济增长中的核心因素。先进的技术是促进经济增长的源泉,但它只是一种潜力,一个必要条件,而不是充要条件。技术进步,必须有一个与之相适宜的......
多组分纺织品定量化学分析计算方法研究
发布时间:2022-09-01
摘要: 关键词:多组分纤维含量;顺序溶解;计算方法 1 原理 混纺产品组分经定性检测后,选用适当的试剂,把混纺产品中的组分纤维按顺序逐一溶解,从溶解失重和不溶纤维的重量计算出各组分纤维的百分含量。 2 试剂、仪器及试验......