浅述奶牛传染病检测和预防措施
一、材料与方法
1.材料 乙型肝炎诊断试剂盒购于上海某生物有限公司；牛传染性胸膜肺炎补体结合反应抗原、标准阴性血清和阳性血清、溶血素补体由某生物制品厂提供；牛传染性鼻气管炎抗原、IBR弱毒株、阳性血清购于中国兽医药品监察所，阴性血清取自检查牛；奶牛血清来源于某省市的奶牛场和奶牛专业户。 2.方法 (1)酶联免疫吸附试验检测奶牛类人乙型肝炎 ①每孔加入待检样品50μL，设阴、阳性对照各2孔，每孔50μL，并设空白对照1孔。②手工洗板，弃去孔内液体，洗涤液注满每孔静置5s，甩干、重复5次。③每孔加入酶结合物50μL(空白对照除外)，充分混匀，封板，置37℃孵育30min。④重复操作②。⑤每孔加显色剂A液、B液各50μL，充分混匀，封板，置37℃孵育15min。⑥每孔加入终止液50μL，混匀。⑦用酶标仪读数，取波长在450nm，先用空白孔校零，然后读取每孔D值。 (2)类人乙型肝炎病理形态学观察 (3)补体结合反应检测牛传染性胸膜肺炎 二、试验结果 1.奶牛乙型肝炎 (1)奶牛肝功能检测 (2)奶牛乙型肝炎病毒形态学观察 将HB-sAg、HBeAg双阳性奶牛肝脏组织做电镜观察，发现肝脏组织中有密集的HBV颗粒，包括大球形Dane颗粒、小球形颗粒、管球形颗粒3种。这些颗粒与人HBV的颗粒相似(图1)。 (3)奶牛乙型肝炎病理组织学观察 病牛肝脏主要表现为肝细胞的变性：胞浆疏松、气球样变(水肿变性)、脂肪变性、嗜酸性变、毛玻璃样变，肝细胞坏死，炎症细胞浸润，肝实质细胞增生和间质组织增生(图2、3)。 (4)奶牛乙型肝炎超微结构观察 肝细胞胞浆内线粒体变性、坏死、溶解、消失。核膜的双层膜不清晰或破裂，核孔增大。胶质纤维变性、严重肿胀、变性、坏死(图4、5)。 2.奶牛传染性鼻气管炎 传染性鼻气管炎抗体滴度测定结果 三、治疗 节痛可注射水杨酸钠溶液。 四、综合防制措施 从科学养殖人手，改善饲养环境，加强综合管理，采用合理的免疫程序。 1.预防注射 2.严格执行检疫制度 从没有疫情的地方购进奶牛，购买前要查看检疫证明，购进后一定要隔离饲养14d以上，无异常情况再混群饲养。 3.加强饲养管理 采用全进全出的养殖模式。冬天既要注意牛舍的保暖，又要注意通风。在高热季节，做好奶牛舍的通风和防暑降温，提供充足的清洁饮水。保持牛舍干燥，保持合理的饲养密度，降低应激因素。保证充足的营养，增强奶牛群抗病能力。 4.对饲养环境执行严格消毒 搞好环境卫生，及时清除奶牛舍粪便及排泄物，对各种污染物进行无害化处理。使用复合醛类等消毒剂对饲养场、奶牛舍内及周边环境进行消毒，农村散养奶牛专业户的牛圈舍可使用新鲜的生石灰进行消毒。