出口海水网箱养殖鱼类病害调查研究
为了提高海水养殖鱼类品质、规范养殖生产、减少养殖自身污染、保障鱼类食用安全和出口质量，本文作者开展了出口海水网箱养殖鱼类的病害调查研究。对浙江省台州海域8个养殖区域(其中玉环5个、温岭2个、乐清1个)进行周年实地调查，及时取样，实验与分析相结合的方法，通过相关县市水产技术推广站每年提供的数据等获取流行病学资料，按流行病学统计方法进行资料分析和处理。结果显示，海水网箱养殖鱼类细菌性病害仍是危害养殖生产的最常见、影响最大、经济损失最严重的病害。
1 实验对象和方法 1.1实验对象 以鲈鱼、美国红鱼、黑鲷、真鲷等主要品种为调查实验对象。分4个不同季节对8个养殖区域随机抽样检测分析。 肉眼观察：主要观察鱼类外观症状如长短、粗细、体形，体表及鳍条有否破溃、附着物、缺损、充出血、肿块；鳃盖有否肿大，肛门是否红肿等。解剖检查：将鱼置于白搪瓷盘中从排泄孔处解剖，检查各脏器；打开鳃盖，检查鳃部。显微镜检查：体表刮取少量粘液置于载玻片上，加滴蒸馏水，盖上盖玻片制成水封片于显微镜下镜检；用剪刀剪取部分鳃丝做成水封片镜检；剪开肠管，刮取前中后肠壁上的粘液和内容物做成水封片镜检；剪取少量后。肾组织做成水封片镜检。细菌培养纯化和药物敏感试验：在无菌状态下剪取病鳗体组织，接种于选择性细菌培养基上(如糊精品红培养基、RS培养基、AOA培养基)，适当温度下培养并纯化，用于药物敏感试验。 1.3快速检测手段 1.3.1血清学凝集反应在一定的电解质存在下，抗原吸附其相应抗体而发生凝集块的过程。多种凝集技术已应用于鱼类的细菌病诊断。凝集反应的灵敏度虽然低一些，但速度快，几小时即可获得结果，不仅适用于实验室，也可用于养殖场实地诊断。以(Yoshimizu pokimura，1985)协同凝集反应技术为例：①配制抗体致敏葡萄球菌(sensitizel staphylococuil)；②取病鱼肝、肾或病灶组织，加4 9滴PBS液，匀浆；③经4000r／min离心后，取上清液；④在玻片上加1滴组织上清液，1滴抗体致敏的葡萄球菌悬液，混匀后置于湿盒内反应30－90min；⑤肉眼或低倍显微镜检查结果，凝集反应阳性则表示组织内含有抗体相应的病原。 2 结果与分析 从全年4季节随机抽样的4个不同品种的检测结果分析，夏季养殖鱼类均被检出有细菌，弧菌、发光杆菌、巴斯德菌等为主的病原细菌易引发病害的发生或爆发，应引起高度重视。春冬季节基本未被检出细菌，依据病害调查该时期亦不是病害的高发时期。然而，有检出异尖线虫，美国红鱼和真鲷的检出率最高，异尖线虫数量亦是最多，这将影响鱼类出口的检疫，应引起特别重视。
2.1主要病原体分析及药物试验报告 根据病原体检测结果，本研究周期主要检出异尖线虫和细菌2类病原体。 2.1.1寄生虫类异尖线虫 危害和影响： ①由于寄生吸收鱼体的营养而致养殖鱼类发病、死亡，严重时可并发细菌性疾病而造成大面积的病害，影响鱼类成活率及经济效益。 ②影响养殖鱼类的商品外观和品质，尤其是出口养殖鱼类，严重时影响出口销售，且一旦大量发现可能增加出口检疫程序，从而影响出口创汇。 ③喜食生鲜海鱼和烹调不当的消费者食用后造成寄生虫感染而出现各种症状，如胃肠不适、腹部剧痛、恶心、呕吐和腹泻等，严重时可并发其他疾病。 因目前还未有药物可直接杀死鱼类体内的异尖线虫，故应从环境治理和切断病原体入手，同时增强养殖鱼类的体质。 预防措施： ①合理布局，改善环境。从检出鱼来源分析，主要是养殖年份较长和养殖密度较高的海区。因此要着重对养殖渔排进行改造和布局的调整，以力求改善养殖环境，减少寄生虫滋生的温床，即减少渔排数量、增大网箱规格、加大渔排间距、实行海区轮养等。 ②合理选用饲料品种。饲料种类直接影响养殖鱼类的体质和寄生虫的感染率。因此最好的投喂饲料首选为质量较好的配合饲料，在目前还没有质量完好的且养殖单位没有完全接受配合饲料的情况下，宜选用新鲜的小鱼虾，以选用非肉食 性的鲐鲣鱼(即青鲇鱼)为佳，而肉食性的小杂鱼(尤其是近海捕捞的白姑鱼、龙头鱼等)相对寄生的寄生虫多些。 ③严格处理，切除病原。除配合饲料外，投喂的饲料应进行适当的处理，尤其是病害流行季节，以减少病原的传播。常用的杀灭方法有：一是将饲料鱼进行冷冻处理，即在-20℃的温度下冷冻24h或-4℃冷冻5d以上，可杀死寄生虫；二是将饲料用消毒剂或杀虫剂进行浸泡或喷洒。也可采用熟化的方法。 ④防治结合，消灭病害。根据寄生虫发病的流行季节，每年在发病前的半个月至一个月按照寄生虫预防和防治方法，每隔10－15d对养殖鱼类进行预防，减少寄生虫病爆发的可能性，同时在发病期进行寄生虫和细菌性疾病的综合防治。 ⑤严格检疫，谨慎出口。养殖鱼类出口前尤其是在发病或流行季节，要仔细检查养殖鱼类是否患有寄生虫病或其他疾病，一旦发现应进行及时治疗，痊愈后方可出口。以免对方在检疫或使用时发现寄生虫而采取的制裁。 2.1.3作者选取溶藻孤茵为代表进行了药物试验，现将结果报告如下 MIC和MBC值测定：从药敏实验所得结果中选择了3种抗菌能力较好的药物采用两倍稀释法对溶藻弧菌作MIC、MBC值测定，试验结果如表2所示。从表2中可以看出不同药物对溶藻弧菌的MIC值和MBC值各不相同，其中以复方新诺敏的作用效果最明显，分别为1.96μg／cm3和3.92μg／cm3。 表2试验药物对溶藻弧菌的MIC值及MBC值 药敏实验结果表明，所分离的溶藻弧菌对复方新诺敏、磺胺+TMP、庆大霉素等3种药物较为敏感，可作为预防和治疗鱼类弧菌性疾病的药物。根据药物敏感实验结果，选择抑菌作用较强的这3种抗菌药物进行了最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)的测定。结果表明，复方新诺明的MIC值最小，磺胺+TMP次之，庆大霉素最高。这与药敏实验的结果一致。在实际应用中，可参照药物敏感性试验结果，从中选取最佳药物，迅速控制和预防疾病的发生。 3 小结与讨论 海水网箱养殖鱼类是台州海域养殖生产出口创汇的主要途径，尤以鲈鱼、美国红鱼、黑鲷、真鲷等为主要品种。因此，加强对出口创汇品种的疾病检测和病害防控技术研究，是提高海水养殖鱼类品质、确保食品安全和国际市场竞争力、维护消费者利益、保障顺利出口的最根本要求。定期对鲈鱼、美国红鱼、黑鲷、真鲷等出口海水网箱养殖鱼类进行了病原体的检测和分析，达到以防为主，防治结合。从各批次的检测结果分析，夏季养殖鱼类均被检出有细菌，弧菌、发光杆菌、巴斯德菌等为主的病原细菌易引发病害的发生或爆发，应引起高度重视。春冬季节基本未被检出细菌，依据病害调查该时期亦不是病害的高发时期。然而，有检出异尖线虫，美国红鱼和真鲷的检出率最高，异尖线虫数量亦是最多，这将影响鱼类出口的检疫，应引起特别重视。以浙江省地方标准(DB／T568 2005)“深水网箱无公害鱼类养殖技术规范”为依据，结合台州海区潮流、岛礁海湾屏障条件、海水网箱类型以及排列方式，设计了通用性的、生态性的、调控性的海水鱼类健康养殖技术模式及其操作规范，以期达到对养殖鱼类病害实行综合防控，保障海水网箱养殖鱼类的质量安全。