关键词：农杆菌（Agrobacterium）;玉米（Zea mays L.）自交系;遗传转化;phyA基因
Optimizing Conditions of Transforming phyA Gene into Maize with Agrobacterium
XU Dan-dana，WANG Pi-wub，ZHAO Han-dana，LIU Shuanga，CHENG Zhao-tinga，GUAN Shu-yana
（a.College of Life Sciences;b. College of Agronomy，Jilin Agricultural University， Changchun 130118， China）
Key words： Agrobacterium; maize inbred lines; genetic transformation; phyA gene
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 外植体 采用玉米自交系GS01的胚性愈伤组织作为遗传转化的受体进行转化，由吉林农业大学生物技术中心实验室提供。
1.1.3 培养基 本试验所用的培养基见表1。
3）农杆菌转化玉米愈伤组织。将含有质粒pCA
2 结果与分析
2.1 不同菌液浓度对玉米抗性愈伤组织转化率的影响
2.2 不同侵染时间对玉米抗性愈伤组织转化率的影响
2.3 不同激素对玉米抗性愈伤组织分化及再生的影响
3 小结与讨论
农杆菌介导法转化玉米愈伤组织除了受基因型、愈伤组织状态及菌种种类等因素影响外，农杆菌菌液的浓度、侵染愈伤组织时间和添加不同的激素也会对其产生重要的影响。如果农杆菌菌液浓度过低，那么就会导致农杆菌附着于外植体伤口处的浓度低，以至于不能进行充分转化;而菌液浓度过高，那么农杆菌生长已处于对数生长后期，侵染能力会下降，易导致在共培养时农杆菌的过度增长，加大了对愈伤组织的损害，导致了外植体的褐化死亡。如果侵染时间过短，只有很少的农杆菌吸附在外植体上，导致T-DNA不能有效转移或转化的细胞不够多，从而降低了抗性愈伤组织转化率;相反，若农杆菌侵染时间过长，农杆菌会过度繁殖，最终导致农杆菌的污染或因农杆菌毒性过强而使外植体褐化死亡，二者都可以降低抗性愈伤组织转化率[14-16]。培养基中添加不同种类和浓度的激素对抗性愈伤组织的分化与也起着重要的作用，在本试验设定条件下，6-BA对抗性愈伤组织分化及再生的效果比KT好，不同种类和浓度的激素配合使用对抗性愈伤组织分化和再生的效果好。
参考文献：
[4] 佟屏亚.玉米跃升为中国“谷物之王”---新世纪中国玉米生产发展报告[J].现代种业，2012（7）：6-9.
[8] RUTHEFURD S M， CHUNG T K， MOREL P C， et al. Effect of microbial phytase on ileal digestibility of phytate phosphorus， total phosphorus， and amino acids in a low-phosphorus diet for broilers[J].Poult Sci，2004，83（l）：61-68.
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