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基因枪介导的转基因小麦的获得与鉴定

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基因枪介导的转基因小麦的获得与鉴定
时间:2022-07-25 01:30:19     小编:

摘要:运用基因工程技术将外源抗病基因直接导入具有优良农艺性状的小麦品种中,能够获得抗赤霉病小麦新品种。采用基因枪介导的共转化法,以bar基因为筛选标记,将几丁质酶基因导入长江中下游小麦栽培品种郑麦9023,T0代经过PCR鉴定,获得6株阳性植株,表明几丁质酶基因已整合到小麦基因组中。

关键词:小麦;赤霉病;基因枪转化;几丁质酶基因

Abstract: Genetic engineering can directly introduce exogenous antifungal genes into elite wheat with to obtain new wheat varieties against FHB (Fusarium Head Blight). Using bar as selection marker, trichoderma chitinase gene(UEch42) was introduced into immature embryos of Zhengmai 9023 by biolistic co-bombardment. PCR results showed that 6 transgenic plants were obtained in T0 generation, indicating that genes were integrated into wheat genome.

Key words: wheat; FBH (Fusarium Head Blight); microprojectile bombardment; chitinase gene

小麦赤霉病(Fusarium Head Blight,FHB)是由禾谷镰刀菌引起的禾谷类真菌病害,其致病菌主要在开花灌浆期侵染小麦的穗部,造成穗腐、粒腐,引起减产,甚至颗粒无收。禾谷镰刀菌在侵染小麦的过程中会产生单端孢霉烯族毒素(Trichothecenes,单族毒素),会滞留在子粒上进入食物链,从而引起食品安全问题,危及人畜健康,近年来随着气候的变暖,小麦赤霉病在北美和欧洲大陆也时有大面积发生,这严重影响着小麦生产区的粮食安全。

研究表明,几丁质是一种广泛分布于多数真菌细胞壁上的主要成分。它是N-乙酰-D-葡萄糖胺以β-1,4-糖苷键连接的多聚物。植物中的N-乙酰葡萄糖胺以糖酯键形式存在,而非线性同聚物,即植物中缺少该酶的有效底物。所以几丁质酶可以降解病原真菌细胞壁中的几丁质,破坏细胞新物质的沉积致使病原体死亡,而且产生的细胞壁碎片具有诱导作用,从而刺激寄主植物的抗病反应。通过基因工程的手段将几丁质酶基因转入小麦中,使小麦获得分泌几丁质酶(Chitinase)的能力。当禾谷镰刀菌入侵小麦时,转基因小麦分泌的几丁质酶可将此真菌的细胞壁分解,抑制真菌的侵染和繁殖,从而达到抗病的效果。

本研究采用基因枪共转化的方法,利用bar基因作为筛选标记基因,将含有几丁质酶基因用于基因枪转化,以期获得含有几丁质酶基因的转基因小麦,并探索利用几丁质酶基因改良小麦抗赤霉病性状的可行性,对小麦提高赤霉病抗性研究具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料

试验所用小麦品种郑麦为9023,质粒为pXJC- ch42、pBar。

[9] ZHAO Y, QIAN Q, WANG H Z, et al. Co-transformation of gene expression cassettes via particle bombardment to generate safe transgenic plant without any unwanted DNA[J]. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant,2007,43: 328-334.

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摘 要:分析了大白菜基因组中3个与拟南芥CBL4直系同源的基因,并进行了比较分析。结果表明,大白菜3个CBL4基因在序列和结构上非常保守,但在顺式调控元件上有所不同,暗示其在功能上存在分化。 关键词:大白菜;CBL4;遗传进化;序列分......
民族文化基因与诚信精神培育
发布时间:2023-04-02
摘 要 诚信也是一种资源,具有经济社会价值,诚信精神是一个民族的立世之本。诚信教育的形式多种多样,从民族优秀文化中挖掘、整理、弘扬诚信观念的合理内核,从民族优秀文化中汲取营养,使之应用到诚信教育之中是一条重要的途径。 关键......
悲痛只因为得闲
发布时间:2022-12-31
感情生活不如意的人,如果很快以另一段感情来填补空缺,如果寄情于事业奋斗,如果移爱普及世人……总之,如果他忙碌起来,一定没有时间悲痛。 有些人悲痛只因为得了闲,闲的。 闲来无事,把新仇旧恨一再反刍,积怨日深,除非遇上......
喜得“石后”话因缘
发布时间:2023-02-04
去岁暖冬,阳光亮丽。翻过年来,老天突然变脸,一场大雪铺天盖地,来了个倒春寒。数九毕竟已经过半,两三天就冰化雪消了。无巧不巧,恰在这时,偶得一宝,喜出望外,一股暖流涌入胸怀。春风得意,畅快非常。 那天,在一家古玩店,店......
用小事奠定管理的基础
发布时间:2016-05-10
作为一名普通而又平凡的幼儿教师,与孩子之间发生过许许多多的小事,让我意识到班级的管理离不开各种小事与细节。本文针对发生的一些小事,浅谈几点体会: 一、善于观察,尊重幼儿 所有的真爱基于一份尊重,孩子虽小,尊重并不可......
金枪鱼肉降解用高产蛋白酶菌株的筛选及鉴定
发布时间:2020-01-16
摘要:采用透明圈法从舟山普陀白山土壤中筛选出3株能分泌胞外蛋白酶的菌株,并对蛋白酶活力最高的菌株进行分子鉴定及最适宜生长条件分析。选择福林酚试剂法测定其蛋白酶活力,对蛋白酶活力最高的菌株进行16SrRNA基因测序,用MEGA软件构建系统发育树,并考察其接种量、温度、时间对该菌株产酶活力的影响。结果表明,zjoub-1菌为高产蛋白酶菌属,并确定为枯草芽孢杆菌。该菌株用于金枪鱼暗色肉发酵时的最适宜条件.........
显性艺术与隐性文化基因互证
发布时间:2015-08-25
摘要:采茶戏作为传播、展现赣南客家民系隐性文化基因的重要媒介,对于客家民系的繁衍、发展影响重大。通过对赣南采茶戏与客家族群文化共性的探析,对采茶戏表演、内容和精神实质的考察,以及对客家族群“头人”现象的研究,使得客家......
美国外交战略的文化基因
发布时间:2023-06-09
国务院侨务办公室副主任美国最近批评中国限制非政府组织的活动,对中国制定《国家安全法》也颇有微词。这些明显的认知错误有美国对中国固有的偏见,也有美国个人主义至上的文化与中国不同的因素。 中美两国远隔重洋,有着完全不同的文......
腰椎间盘突出形成原因及其法医学鉴定
发布时间:2023-02-27
腰椎间盘突出症是因椎间盘变性,纤维环破裂,髓核突出刺激或压迫神经根、马尾神经所表现的一种综合征,是腰腿痛最常见的原因之一。腰椎间盘突出症中以腰4~5,腰5~骶1间隙发病率最高,约占90%~96%。椎间盘退行性变是诱发本症的基本......
基于会计视角浅析企业文化基因的培育
发布时间:2022-10-19
[摘 要] 企业文化是企业的灵魂,是企业个性化的表现。会计作为一个信息系统,贯穿企业整个生产经营活动。本文基于会计的视角,深入探讨了会计在培育企业文化基因过程中扮演的角色,主要是从会计职业道德与会计信息这两个方面展开论述......
统计年鉴与基尼系数
发布时间:2023-07-15
基尼系数有很多种算法,包括万分法、人口等分法、三角形面积法、弓形面积法、积分法、基尼平均法、城乡加权法等等,但很多算法都不适合利用统计年鉴来计算,有些算法虽然是根据统计年鉴来计算,但由于该算法所依据的数据,统计年鉴并没有......
操作、探究、应用让学生获得数学基本活动经验
发布时间:2023-03-19
一、让学生在操作中积累数学基本活动经验儿童的智慧在自己的指尖上。学生在动手操作体验的过程中,能够获得直接经验,促进思维的发展,而思维的发展又会指导儿童的双手更灵巧地活动,也就是通常所说的心灵手巧。因此,在教学过程中,应留给学生充裕的时间,放手让学生自己去操作、实验、计算、推理。例如,教学统计时,我让学生动手测量自己或同学的鞋码并记录数据,然后在学习小组中交流。教师引导学生总结统计的含义与意义。在每.........
利用CRISPR/Cas9建立肠癌抑制基因Mindin的稳定敲除细胞株
发布时间:2016-06-22
摘要:目的 利用CRISPR/Cas9技术建立肠癌抑制基因Mindin的稳定敲除细胞株。方法 针对Mindin基因编码序列设计三个向导RNA(sgRNA),将表达sgRNA和Cas9蛋白的质粒共同电转进小鼠成纤维细胞L929中,加入药物筛选获得细胞库。测序检测细......
基于模因论的日语借词研究
发布时间:2023-06-09
借词是文化交流的记录和载体,在跨文化交流中见证着文化传播和发展的历史轨迹。中国自古以来就与世界上不少国家和民族有过接触,这种中外跨文化交际过程伴随着语言的使用和接触,也必然会带来语言的交流和融合,借词的出现是跨文化交......
Hogan佛罗伦萨的闲适优雅基因
发布时间:2023-05-05
佛罗伦萨和米兰都是著名的世界时尚之都,无数的名牌店和名牌街散落在这两个城市的脉络里,每日的呼吸里都仿佛带着让人迷醉的各种时尚的气息。他们相同但却又各自不同,因为拥有古老的文化历史,让这里的时尚更有历史味和文艺腔。但是......
不当得利与物权行为无因性
发布时间:2023-05-04
不当得利与物权行为无因性 不当得利与物权行为无因性 不当得利与物权行为无因性 [摘 要] 不当得利与物权行为无因性不是对立的。以正当性为连接点,不当得利中“法律上的原因”并非是使物权得以......
浅谈基因改造中快速PCR定点突变方法及研究
发布时间:2022-08-02
1 材料 11 菌株与质粒 E.coli DH5α,由本实验室保存。质粒pESOD(含hCu,Zn-SOD基因、Ampr基因以及EcoRI酶切位点,整个质粒约33kb)由本实验室构建,并转化于E.coli DH5α保存。 12 主要试剂 Pfu高保真DNA聚合......
我国基因的所有权制度探讨
发布时间:2022-09-12
一、基因的民法属性 ( 一) 基因的概念 1909 年丹麦遗传学家约翰逊首先提出基因这一名词。1910 年美国遗传兼胚胎学家T. H. 摩尔根建立了著名的遗传学说,将基因与染色体联系起来,认为基因是一种物质,是染色体上的一个特定的区段。并......
基于小波神经网络的麦蚜发生量预测研究
发布时间:2023-03-05
关键词:小波神经网络;发生量;预测 Study on the Prediction of Occurrence Quantity of Wheat Aphids Based on Wavelet Neural Network JIN Ran,LI Sheng-cai (Agronomy College,Shanxi Agricultural Unversity,Taigu,Sha......
基于物联网的小麦苗情诊断管理系统设计
发布时间:2022-11-09
0引言 小麦是中国最重要的粮食作物之一,由于生长周期较长且分布广泛,容易遭遇各种胁迫和灾害影响,如干旱、霜冻、干热风等频发,严重影响小麦正常生长,导致产量减少、品质下降。目前在整体上,中国小麦苗情监测与诊断技术落后,主......
解析全氟丁基磺酸钾对小麦、水稻的毒理学
发布时间:2023-02-01
1 材料与方法 1.1 试验设备 分析天平(METTLER TOLEDO AL 204);手持式pH 计(HANNA HI98128); 人工气候箱(SXMQHX-400BS-III);照度计(Testo 545);数字温度计(TES-1314);水份仪(Moisture analyzer HG 63)。 1.2 试验人工土壤 按每公斤......
活得累,全是因为“装”
发布时间:2022-10-25
这个世界,有的人活得累,全是因为“装”。你看,有装高雅的,有装正经的,有装孙子的,有装相的,有装蒜的,但就是没有装俗的。俗人不用装。套用一句话叫:俗人本天成,雅者偶得之。 俗人的喜好也是俗的。喝点小酒,打点小牌,吹点......
如何应对失败将决定能否获得成功
发布时间:2015-11-23
维珍的老理查德・布兰森(Richard Branson)经常被人称作商界奇才,他凭着一种玩的心态把自己的事业从一家小小的学生杂志,变成了涉足航空、旅游、娱乐等多个领域在全球拥有超过四百家公司的行业巨头。虽然布兰森的成功模式看起来是不......
“学霸”吴磊没长残是因为爸爸妈妈基因好
发布时间:2023-04-12
95后小鲜肉又来了!一部于正的《神雕侠侣》让“包子脸姑姑”备受调侃的同时,小杨过的绝世美颜也让出生于1999年的阳光美少年吴磊迅速涨粉至100多万。在这个95后小鲜肉纷纷占领娱乐圈半壁江山的时刻,童星出身的吴磊渐渐成为一个无法被......