关键词：单叶蔓荆（Vitex rotundifolia L.）；总黄酮；正交试验；提取工艺
Key words：Vitex rotundifolia L.；total flavonoids；orthogonal experiment；extraction technology
本试验采用正交试验对单叶蔓荆提取工艺进行优化，对影响提取的各种因素及条件进行了探讨，旨在为单叶蔓荆的综合开发利用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
单叶蔓荆由烟台益生堂药业有限公司提供，经滨州医学院药学院天然药物实验室鉴定为单叶蔓荆。
U-190型紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；JA5003B型电子天平、DHG-9053型真空干燥箱（上海精密仪器仪表有限公司）；THH-6型恒温水浴锅（上海乔跃电子有限公司）；SHZ-Ⅲ型循环水式多用真空泵、RE-301型旋转蒸发仪（巩义市瑞德仪器设备有限公司）。
1.3 试剂
芦丁对照品（中国药品生物制品检定所），其他试剂均为分析纯。
1.4 方法
1.4.1 单叶蔓荆中总黄酮含量的测定
1）供试样品溶液的制备。准确称取单叶蔓荆粗粉30 g，于1 000 mL烧瓶中，按要求加入不同体积分数乙醇溶液，加热回流提取一定时间，过滤，减压回收溶剂，干燥，称重，得到单叶蔓荆干膏。精确称取在不同提取条件下得到的单叶蔓荆干膏10 mg，于10 mL容量瓶中，用60%乙醇溶解，定容后备用。
2）标准溶液的制备。精确称取于120 ℃干燥至恒重的芦丁对照品10 mg，于100 mL容量瓶中，加60%乙醇30 mL，水浴微热使其完全溶解，放冷，60%乙醇定容至100 mL，制成0.100 mg/mL芦丁对照品溶液。
4）精密度试验。精确吸取2.0 mL芦丁对照溶液于25 mL容量瓶中，按标准曲线绘制方法，平行操作5次，测定该方法的精密度。
5）稳定性试验。取适量供试溶液，按标准曲线绘制方法，于0、2、4、6、8 h分别测定其吸光度，测定该方法的稳定性。
6）重复性试验。取同一批药材，按照以上方法制备供试样品溶液，并按标准曲线绘制所述方法测定吸光度，平行操作5次，测定该方法的重复性。
7）回收率试验。精确吸取6份已知含量供试样品溶液各0.5 mL，加入芦丁标准品溶液，按标准曲线绘制方法测定其吸光度，计算单叶蔓荆总黄酮的含量。
供试样品总黄酮含量测定：精确吸取5 mL供试样品溶液于25 mL容量瓶中，按标准曲线绘制项方法测定其吸光度，并代入回归方程，计算单叶蔓荆总黄酮的含量。
2 结果与分析
2.1 标准曲线绘制
以吸光度A为纵坐标，芦丁浓度C为横坐标绘制标准曲线，并进行线性回归分析，得到的回归方程为A=0.057 0C-0.008 3（r=0.999 8）。结果表明，芦丁在0.004～0.045 mg/mL浓度范围与其吸光度呈良好的线性关系。
2.2 单叶蔓荆总黄酮提取工艺优化
2.2.2 验证试验 验证试验结果表明，单叶蔓荆总黄酮的含量分别为2.50、2.49、2.52 mg/g，平均含量为2.50 mg/g，RSD=0.63%（n=3），表明该工艺条件稳定、可靠。
3 小结与讨论
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