关键词:泽泻;23-乙酰泽泻醇B;诱导子
Abstract: In order to study the effect of different elicitors on the accumulation of alisol B 23-acetate in [Alisma orientale(Samuels)Juzep.], A. rhizoma plants were treated by SA, GA and ABA with different concentration. The results showed that low concentration of SA, GA and ABA promoted the accumulation of alisol B 23-acetate, while the high concentration had inhibition. The content of alisol B 23-acetate was 715.4 μg/g, the highest content at the eighth day after treated by SA. Compared with SA, the effects of GA and ABA were poorer.
Key words: [Alisma orientale (Samuels) Juzep.]; alisol B 23-acetate; elicitor
诱导子(Elicitors)是一种特殊的诱发因子,能够开启植物体内代谢过程中酶的活性,因而能够显著地增加植物中次生代谢产物的含量,有时候甚至能诱导植物产生出新的次生代谢产物。目前,诱导子已经广泛应用于许多中药材次生代谢产物的生产中,如人参[7]、鱼腥草[8]、丹参[9]、藏红花、黄芩等。但是诱导子在泽泻中的研究却鲜有报道。为此,试验采用水杨酸、赤霉素和脱落酸三种诱导子分别处理泽泻,研究泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量的变化。
1 材料与方法
1.1 材料
试剂:乙腈为色谱纯(德国Merck公司),水为娃哈哈超纯水,标准品23-乙酰泽泻醇B购于国家标准物质信息中心,水杨酸、赤霉素、脱落酸、无水乙醇、石油醚、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等均为国产分析纯。
4)统计分析。数据采用Excel和DPS软件进行分析。
2 结果与分析
2.2 方法学考察
2.2.2 重复性试验 精密称取同一批的泽泻粉末6份,依照上述方法制备供试溶液,进样检测。结果表明23-乙酰泽泻醇B峰面积的RSD为1.74%,说明该方法重复性较好。
2.2.4 加样回收率试验 精密称取泽泻块茎粉末6份,每份0.3 g,其中3份加入0.2 mL的浓度为300 μg/mL的23-乙酰泽泻醇B标准品溶液,3份不加,依照上述方法制备供试溶液,进样检测。结果表明23-乙酰泽泻醇B的平均回收率为98.1%,RSD为3.10%。
2.3 23-乙酰泽泻醇B标准曲线的绘制
2.4 不同诱导子对泽泻中23-乙酰泽泻醇B积累的影响
2.4.2 赤霉素处理对23-乙酰泽泻醇B积累的影响
采用DPS软件对不同浓度赤霉素处理后样品中23-乙酰泽泻醇B含量进行二因素方差分析,结果见表4、表5和表6。
采用DPS软件对不同浓度脱落酸处理后样品中23-乙酰泽泻醇B含量进行二因素方差分析,结果见表7、表8和表9。
3 小结与讨论
试验结果表明,不同类型以及不同浓度的外源诱导子对泽泻中23-乙酰泽泻醇B的累积会产生一定影响,但其影响程度不同。从总体趋势来看,在使用诱导子处理后的一段时间内,泽泻中23-乙酰泽泻醇B的含量呈先上升后下降的趋势。从浓度上看,3种不同的诱导子在低浓度下都能促进泽泻中23-乙酰泽泻醇B的积累,在高浓度下则表现出一定的抑制作用。
参考文献:
[3] 陈 涛,刘 本.泽泻中成分泽泻萜醇B乙酸酯研究进展[J].科技通报,2008,24(4):485-488.
[4] FONG W F, WANG C, ZHU G Y, et al. Reversal of P-glycoprotein-mediated multidrug resistance by alisol B 23-acetate[J]. Biochemical Pharmacology, 2004, 14: 160-165.
[8] 倪细炉,谭玲玲,王玲丽,等.不同诱导子处理对鱼腥草幼苗槲皮素含量的影响[J].鲁东大学学报(自然科学版),2008,24(3):254-259.