家禽MHC分子多态性与抗病育种
摘要：主要就家禽的组织相容性复合体（ＭＨＣ）基因结构与多态性、与疾病的相关性以及抗病育种等方面进行了阐述，并提出了存在的问题和今后的研究方向。
关键词：家禽；ＭＨＣ；分子多态性；抗病育种 中图分类号：Ｓ８１３．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）17－3480-03 Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｏｆ ＭＨＣ ａｎｄ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ Ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｏｆ Ｐｏｕｌｔｒｙ ＺＨＡＯ Ｓｈｕ－ｊｕａｎ１，２，ＺＨＯＵ Ｘｕ１，ＰＡＮＧ Ｙｏｕ－ｚｈｉ２，ＬＵ Ｗｅｎ－ｄｏｎｇ２，ＷＡＮＧ Ｂｏ２ （１.Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｊｉｌｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００６２， Ｃｈｉｎａ； ２.Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｈｅｎａｎ Ｕｎｉｖｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｌｕｏyａｎｇ ４７１００３，Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： ＭＨＣ ｗａｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｗｈｉｃｈ ｈａｄ ｏｂｖｉｏｕｓ ｒｅｌａｔｉｖｉｔｙ ｗｉｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｉｎｈｅｒｉｔｅｄ ｓｔｅａｄｉｌｙ． Rｅｓｅａｒｃｈ ｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｏｆ ｐｏｕｌｔｒｙ MHC ｗａｓ ｏｎｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｓｔｅｐ ｆｏｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｂｒｅｅｄｉｎｇ． ＭＨＣ′ｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎｄ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ， ｒｅｌａｔｉｖｉｔｙ ｗｉｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｄｉｓｅａｓｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｗｅｒｅ ｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｄ． Ａｎｄ ｆｉｎａｌｌｙ ｔｈｅ ｐｒｏｂｌｅｍｓ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｌｓｏ ｐｒｏｐｏｓｅｄ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： pｏｕｌｔｒｙ； ＭＨＣ； mｏｌｅｃｕｌａｒ pｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ； dｉｓｅａｓｅ rｅｓｉｓｔａｎｃｅ bｒｅｅｄｉｎｇ 主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）编码免疫系统中极为复杂且具高度多态性的一类细胞表面转膜蛋白即ＭＨＣ抗原。ＭＨＣ广泛存在于脊椎动物中，决定着动物的免疫排斥反应，在机体免疫系统中发挥着非常重要的抗原递呈作用［１］。家禽疫病的发生，可导致其生产性能下降、产品低劣、患病禽死亡等，从而造成巨大的经济损失，甚至影响人类健康。研究证实，ＭＨＣ与许多疾病的抗性、易感性以及生产性状密切相关［２］，因此，分析、鉴定并克隆出与疾病抗性相关的ＭＨＣ基因，并开展多态性的研究，采用抗病育种的方法从家禽种质上提高其抗病性是从根本上控制家禽疫病的最佳途径。 １家禽ＭＨＣ的分子结构与多态性 １．１ＭＨＣ分子结构 家禽ＭＨＣ分子首先是由一种血型被识别的，因此被命名为Ｂ复合物。根据ＭＨＣ分子编码蛋白的类型，可将其分为３类：Ｂ－Ｆ、Ｂ－Ｌ、Ｂ－Ｇ，分别编码细胞表面的Ⅰ类、Ⅱ类、Ⅳ类糖蛋白，其中的Ｂ－Ｆ和Ｂ－Ｌ分别相当于哺乳动物的ＣｌａｓｓⅠ类和ＣｌａｓｓⅡ类基因，而Ｂ－Ｇ是禽类特有的基因位点，也称为Ⅳ类，在染色体上三者的排列顺序是Ｂ－Ｇ、Ｂ－Ｆ、Ｂ－Ｌ，Ｂ－Ｌ、Ｂ－Ｆ间紧密连锁，且来自于双亲一方，而Ｂ－Ｇ来自于另一方。鸡ＭＨＣ的Ｂ－Ｆ、Ｂ－Ｌ、Ｂ－Ｇ已分别被克隆［３］，其中Ｂ－Ｆ、Ｂ－Ｌ部分已被测序［４］。鸭、鹅和鹌鹑在这方面的研究相对较少，但也取得了初步的成果。林常有［５］克隆了鸭ＭＨＣⅠ类分子α２区基因，并用巢氏ＰＣＲ检测到该基因在脑、心、肾、脾、肠和法氏囊中都有表达。贾晓晖等［６］首次克隆了五龙鹅的ＭＨＣⅠ基因序列，并用荧光定量ＰＣＲ法检测到该基因在心、肝、脾、肺、肾、胸腺、法氏囊、脑、肌肉和胚胎中都有表达，在法氏囊中的表达量最多；基因组ＤＮＡ由８个外显子和７个内含子组成。 Ｂ－Ｆ抗原由Ｂ－Ｆ位点编码，由α链和β２微球蛋白以非共价键组成，其中前者含有３４６个氨基酸残基，分α１、α２、α３、跨膜区和胞质区，由ＭＨＣ类基因编码；β链游离于细胞外，非ＭＨＣ基因编码。Ｂ－Ｆ抗原存在于所有的有核细胞，可在５~６ ｄ的鸡胚中检出Ｂ－Ｆ抗原。 Ｂ－Ｌ抗原由Ｂ－Ｌ位点编码，具有丰富的多态性。有α和β两条链通过分别结合紧密的非共价键连接组成，分别含有２２９和２３７个氨基酸。Ｂ－Ｌ抗原存在于抗原递呈细胞表面，如法氏囊细胞、巨噬细胞等。 Ｂ－Ｇ抗原由Ｂ－Ｇ位点编码，为禽类所特有，仅存于鸡红细胞上。近来研究发现Ｂ－Ｇ抗原也参与一些组织相容性反应，可在免疫系统的非红细胞表达，如血小板、外周血Ｂ淋巴细胞、Ｔ淋巴细胞、法氏囊细胞、胸腺细胞等，并且在红细胞上Ｂ－Ｇ抗原量比Ｂ－Ｆ多几倍。 １．２ＭＨＣ分子多态性 罗庆斌等［７］的研究表明，鸡ＭＨＣ Ｂ－Ｆ基因外显子２和３ ＤＮＡ序列的同源性均高于氨基酸的同源性。吴春梅［８］的研究表明，鸡Ｂ－Ｆ区基因外显子２共有２６４ ｂｐ，在６７个北京油鸡和１３４个来航蛋鸡外显子２的碱基序列中分别发现了５０和４２个核苷酸变异位点，并分别引起３１和２５个氨基酸的变异，两个品种也均表现出核酸同源性高于氨基酸序列同源性。通过对两品种序列中突变位点的比较，发现３６个ＳＮＰ位点在两品种中出现，北京油鸡所特有的１４个核苷酸突变中１２个为有义突变；来航鸡特有的６个ＳＮＰ位点中只有２个为有义突变。该结果表明了北京油鸡无论是在ＤＮＡ分子水平还是氨基酸水平上，其多态性均高于来航蛋鸡。Ｈｏｓｏｍｉｃｈｉ等［９］认为鹌鹑ＭＨＣⅡ类Ｂ基因组结构比鸡具有更大的灵活性和多样性。胡团军［１０］进行多态性分析显示，鹅ＭＨＣ Ｉ类分子存在高度多态性，等位基因之间的变异主要集中于α１和α２区，有１４个氨基酸高置换位点，而α３区比较保守。 ２家禽ＭＨＣ与疾病抗性 ＭＨＣ基因在抗原识别、免疫应答与调控、破坏外来抗原靶细胞方面起着重要作用。 ２．１家禽ＭＨＣ与病毒性疾病的抗性 Ｈａｎｓｅｎ等［11］最早证明了鸡ＭＨＣ与马立克氏病（ＭＤ）遗传抗性的相关性，他用血清单倍型异质结合的Ｂ１９ Ｂ２１公鸡与同质结合的Ｂ１９ Ｂ１９、Ｂ２１ Ｂ２１母鸡交配，得到３种组合后代Ｂ１９ Ｂ１９、Ｂ２１ Ｂ２１ 和Ｂ１９ Ｂ２１。人工感染马立克氏病毒（ＭＤＶ）发现带Ｂ２１血清单倍型的鸡抵抗力较强，其死亡率仅为Ｂ１９单倍型携带者的５０％。试验表明ＭＨＣ Ｉ类区域的Ｂ２１单倍型对马立克氏病有抗性，而Ｂ１９单倍型对马立克氏病敏感；并认为Ｂ２１和Ｂ１９在抗ＭＤ上的差异与ＭＨＣ的遗传基础有关。现已鉴定出许多与ＭＤ抗性相关的基因，如Ｂ２１、ＢＱ抗ＭＤ能力强，Ｂ２、Ｂ６、Ｂ１４等有中等抗性，而Ｂ１５、Ｂ１９等易感。鸡对Ｒｏｕｓ肉瘤（ＲＳ）的抗性与ＭＨＣ也有关，Ｂ２ 单倍型多表现出较强的抗性，而Ｂ５则易感。有些ＭＨＣ基因对ＲＳ抗性呈互补性，如Ｂ１ Ｂ１、Ｂ３ Ｂ３对ＲＳ易感，而Ｂ１ Ｂ３则表现出较强的抗性；Ｂ２３ Ｂ２６也比纯合子Ｂ２３ Ｂ２３和Ｂ２６ Ｂ２６有更强的抗性，并报道Ｂ复合体与鸡传染性喉气管炎野毒株的抗性可能也有关［１2］。李红霞等［１3］报道，Ｂ２、Ｂ２１单倍体的鸡对传染性法氏囊病疫苗有较好的免疫反应，Ｂ１３和Ｂ１９型鸡处于中间。Ｂａｃｏｎ等［１4］首次发现Ｂ１５单倍体鸡比Ｂ１3、Ｂ２１型鸡对传染性支气管炎病毒的抗性强。
２．２家禽ＭＨＣ与细菌性疾病的抗性 Ｚｈｏｕ等［１5］进行了ＭＨＣ Ｂ－Ｆ基因外显子２、３ 中的分子标记与免疫性状的关联研究，结果表明鸡Ｂ－Ｆ基因外显子２、３中存在的ＳＮＰｓ与肠炎沙门氏菌的抗体应答存在着显著关联。 蜂窝织炎是一种与大肠杆菌联系最多的深层皮下组织水肿化脓性炎症，Ｍａｃｋｌｉｎ等［１6］发现Ｂ２１ Ｂ２１蜂窝织炎比Ｂ１３ Ｂ１３和杂合子Ｂ１３Ｂ２１发生率高，但病变严重性与ＭＨＣ无关。Ｌａｖｉ等［１7］报道对大肠杆菌疫苗免疫应答水平高低不同的两个肉鸡品系的ＭＨＣ Ｉ位点的基因也不同。Ｃｏｔｔｅｒ等［１8］报道鸡ＭＨＣ与金黄色葡萄球菌病抗性有关，ＢＱ ＢＱ比Ｂ１９ Ｂ１９ 或Ｂ２１ Ｂ２１抗性强。研究表明Ｂ－Ｇ基因与抗低剂量的禽霍乱多杀性巴氏杆菌的基因相连锁，而对高剂量感染的抗性与Ｂ－Ｆ／Ｌ有关［１2］。 ２．３ＭＨＣ与疾病抗性的机制 目前关于ＭＨＣ与疾病抗性的机制有四种解释。一是分子模拟假说，认为某些病原微生物的抗原与ＭＨＣ基因编码抗原分子结构相似，因而机体在受这种病原体感染时不能识别而出现耐受性，不产生免疫应答，保护了病原微生物；或病原微生物刺激机体产生相应的抗体，损伤了与微生物具有共同抗原的组织细胞。二是非免疫竞争假说，认为ＭＨＣ编码抗原与某些激素的细胞膜受体的分子结合部位相似，而非免疫性竞争结合激素。三wWw.LWlm.com是受体学说，认为细胞表面某种型别的ＭＨＣ编码抗原可能是某些微生物受体，故对该种病原有特异亲和力。四是连锁不平衡学说，认为ＭＨＣ并非是直接引起疾病的原因，而是与疾病的易感基因连锁不平衡有关。 ３家禽ＭＨＣ与抗病育种 近年来，家禽生产面临来自疫病的严重威胁，虽然生物制品、抗生素的应用等使疫病问题在一定程度上有所缓解，但疫苗和药品的使用只能控制疫病而不能根除疫病，只有培育遗传抗病的品种才是解决疾病的根本途径。畜禽的抗病特征早在２０世纪３０年代就已被育种学家所认知，但对于抗病力的研究远没有经济性状的选择提高快，可用于育种程序的抗病选择并不多，分子生物学理论和技术的快速发展，使得从分子水平上寻找抗病基因、研究抗病机理成为可能。国外已有许多育种者认识到ＭＨＣ在抗病育种中的重要作用，并逐渐将育种目标转向适应性、抗病力上，培育出一些更适合现代养殖学要求的具有较好抗病力的新品种或品系，如俄罗斯于１９９６年育成抗ＭＤ新品种俄罗斯雪白鸡，该品种雏鸡适应性强，育雏温度为２２～２３ ℃，不存在ＭＤ病害，年产蛋潜力达２５０～３１０枚；美国先锋公司用抗一般不良环境的Ｂ２品系和幼雏生活力强的Ｂ１４品系培育了生活力强的Ｂ１８品系，用抗ＭＤ的Ｂ２１品系和抗一般不良环境的Ｂ２品系培育了生活力强、抗ＭＤ的９３４Ｅ品系；美国海兰公司用Ｂ２和Ｂ２１培育出抗病性强的Ｗ－３６蛋用商品鸡品系；英国索恩伯公司用５年的时间使来航鸡每只年产蛋提高３８枚，饲料消化率减少１６％；英国罗斯育种公司培育出了抗白血病的Ａ、Ｂ品系罗斯褐壳蛋鸡；抗性６倍于敏感系的抗球虫品系也已被培育出来［１3］。 ４问题与建议 ＭＨＣ的突出特性与重要功能使其在免疫遗传学、群体遗传学和动物进化的研究中发挥着重要作用。对家禽ＭＨＣ的研究，以鸡ＭＨＣ较多，其他禽类研究较少。目前，虽然已经破译了禽类ＭＨＣ分子的部分序列，并了解其功能，但ＭＨＣ分子各个基因的具体功能及与其他基因的互作还不是很清楚，在今后的工作中，还要进一步加深对ＭＨＣ结构、功能及其作用机理的研究与探讨。通过研究禽ＭＨＣ而进行抗病育种，可以从直接选择和间接选择两个方面着手，直接选择主要是识别抗性基因型，对于单基因遗传病可进行分子检测，对于多基因遗传病则应进行数量性状基因座（ＱＴＬ）定位或估测抗性遗传力；间接选择的关键是要找到与疾病或抗病力性状关联的标记基因或标记性状，这些标记可以是与疾病有关的候选基因或ＱＴＬ，也可以是与免疫关联密切的ＭＨＣ单倍型，从而有目的培育出抗病力强的品种，为家禽健康养殖奠定良好的基础。我国拥有丰富的地方禽种资源，如狼山鸡、乌骨鸡、北京鸭、狮头鹅、黄羽鹌鹑等，它们具有鲜明的地方特色，抗逆性强，是极其宝贵的抗病育种素材，我们可以充分利用这些资源研究禽ＭＨＣ基因组的功能，进行分子设计、疫苗和药物的生产、基因功能的定位甚至序列功能的直接预测，这些工作将有着广泛的应用前景和发展空间。 参考文献： ［１］ 吴艳，侯水生，刘小林， 等． ＭＨＣ及其在肉鸡和蛋鸡中的不同［Ｊ］． 动物科学与动物医学，２００４，２１（４）：３８－３９． ［２］ 李尚民，原新廷，戴国俊，等．鸡主要组织相容性复合体与抗病育种［Ｊ］． 猪与禽，２００７，２７（２）：７０－７２． ［３］ ＬＡＭＯＮＴ Ｓ Ｊ ． Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ ［Ｊ］． Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，１９９１，３０（１）：１２１－１２７． ［４］ ＫAUFMAN J， MILNE S，G?魻BEL T W， ｅｔ ａｌ ． Ｔｈｅ ｃｈｉｃｋｅｎ Ｂ ｌｏｃｕｓ ｉｓ ａ ｍｉｎｉｍａｌ－ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ ［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ， １９９９，４０１（６７５６）：９２３－９２５． ［５］ 林常有． 鸭ＭＨＣⅠ类分子ｃＤＮＡ克隆及其基因组结构［Ｄ］． 北京：中国农业大学，２００４． ［７］ 罗庆斌，沈翔，任广彩．鸡ＭＨＣ－Ｂ－Ｆ基因外显子２、３的ＳＮＰｓ分析［Ｊ］．养禽与禽病防治，２００５（１０）：６－９． ［８］ 吴春梅．鸡ＭＨＣ Ｂ－Ｆ区基因SＮＰｓ分子标记与免疫性状关系的研究［Ｄ］． 江苏：扬州大学，２００７． ［９］ ＨＯＳＯＭＩＣＨＩ Ｋ， ＳＨＩＩＮＡ Ｔ， ＳＵＺＵＫＩ Ｓ， ｅｔ ａｌ． Ｔｈｅ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ （Ｍｈｃ） ｃｌａｓｓ ＩＩＢ ｒｅｇｉｏｎ ｈａｓ ｇｒｅａｔｅｒ ｇｅｎｏｍｉｃ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｆｌｅｘｉｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｑｕａｉｌ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｈｉｃｋｅｎ ［Ｊ］． ＢＭＣ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ，２００６，７（1）：３２２． ［１０］ 胡团军．鹅ＭＨＣ ＣｌａｓｓⅠｃＤＮＡ克隆、基因组结构、等位基因多态性分析［Ｄ］．北京：中国农业大学，２００４． ［１2］ 马吉飞，陈万芳，陈萍． 鸡主要组织相容性复合体的研究进展［Ｊ］． 动物医学进展，１９９８，１９（４）：４－７． ［１3］ 李红霞，朱庆． 鸡主要组织相容性复合体与抗病性研究［Ｊ］．畜禽业，２００１，１３８（１０）：１０－１１． ［１4］ ＢＡＣＯＮ Ｌ Ｄ， ＨＵＮＴＥＲ Ｄ Ｂ， ＺＨＡＮＧ Ｈ Ｍ， ｅｔ ａｌ． Ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｔｈａｔ ｔｈｅ ＭＨＣ （Ｂ ｈａｐｌｏｔｙｐｅ） ｏｆ ｃｈｉｃｋｅｎｓ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ ｇｅｎｅｔｉｃ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ ｖａｃｃｉｎｅ ｓｔｒａｉｎｓ ｉｎ ｃｈｉｃｋｅｎｓ［Ｊ］． Ａｖｉａｎ Ｐａｔｈｏｌ，２００４，３３（６）：６０５－６０９． ［１5］ ＺＨＯＵ Ｈ， ＬＡＭＯＮＴ Ｓ Ｊ． Ｃｈｉｃｋｅｎ ＭＨＣ ｃｌａｓｓ Ｉ ａｎｄ ＩＩ ｇｅｎｅ ofｆｅｃｔｓ ｏｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｋｉｎｅｔｉｃｓ ｉｎ ａｄｕｌｔ ｃｈｉｃｋｅｎｓ［Ｊ］． Ｉｍｍｕｏｎｇｅｎｅｔｉｃｓ， ２００３，５５（3）：１３３－１４０． ［１6］ ＭＡＣＫＬＩＮ Ｋ Ｓ，ＥＷＡＬＤ Ｓ Ｊ， ＮＯＲＴＯＮ Ｒ Ａ． Ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ ｅｆｆｅｃｔ ｏｎ ｃｅｌｌｕｌｉｔｅｓ ａｍｏｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｈｉｃｋｅｎｓ ｌｉｎｅｓ［Ｊ］． Ａｖｉａｎ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２００２，３１：３７１－３７６． ［１7］ ＬＡＶＩ Ｙ ， ＣＡＨＡＮＥＲ Ａ ， ＰＬＥＢＡＮ Ｔ ，ｅｔ ａｌ． Ｇｅｎｅｔｉｃ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ ｃｌａｓｓ Ｉ ａｌｐｈａ２ ｇｅｎｅ ａｍｏｎｇ ｂｒｏｉｌｅｒｓ ｄｉｖｅｒｇｅｎｔｌｙ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｆｏｒ ｈｉｇｈ ｏｒ ｌｏｗ ｅａｒｌｙ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ［Ｊ］． Ｐｏｕｌｔ Ｓｃｉ，２００５，８４（８）：１９９－２０８． ［１8］ ＣＯＴＴＥＲ ＰＦ， ＲＯＢＥＲＴ Ｌ， ＴＡＹＬＯＲ Ｊ Ｒ． Ｄｉｆｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｃｈａｌｌｅｎｇｅ ｉｎ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ（Ｂ） ｃｏｍｐｌｅｘ ｃｏｎｇｅｎｉｃ ｌｉｎｅｓ［Ｊ］． Ｐｏｕｌｔｒｙ Ｓｃｉｅｎｃｅ， １９９２，７１（1）：１８７３－１８７８．