毕业论文
作者：王槐志 黎万玲 张玉君 陈志宇 朱瑾 郑平 熊燕 董家鸿
【关键词】 诱骗受体3； 肝移植； 保护作用； 大鼠
Protective effects of decoy receptor 3 on rat liver allograft
【Key words】 Decoy receptor 3; Liver transplantation; Protective effect; Rats
1 材料与方法
1.1 重组DcR3/AAV及AAV空病毒颗粒
取预先制备的浓缩重组DcR3/AAV及AAV空病毒颗粒1×109 IU，用乳酸林格氏液稀释至5 ml备用［5］。AAV病毒中自带的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)可作为DcR3表达的标志。
1.3 动物分组
1.4 动物模型的建立
采用经典的2袖套法建立大鼠原位肝移植模型。
1.5 标本采集
1.6 观测指标
1.7 统计学分析
结果以±s表示，各组间均数比较采用方差分析。生存时间采用SPSS 11.5软件绘制成KaplanMeier曲线，比较采用对数秩检验(Logrank)。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 1般情况
手术后5 min左右，大鼠即清醒、站立，30 min后能饮水。第2天各组大鼠的精神、食欲稍差，活动较少。第3天各组大鼠的活动、饮食及精神状况恢复正常。G
2、G3组大鼠第7天开始出现皮肤、巩膜黄染，尿液发黄，毛杂乱，精神、食欲差，活动减少。G4组大鼠则于第15天开始出现上述表现。G1组大鼠未见异常表现。
2.2 生存曲线
2.3 肝功能的改变
2.4 病理改变
3 讨论
根据DcR3的作用机制，我们推测DcR3通过下列途经对移植肝功能起到保护作用：与Fas竞争性结合FasL，阻断宿主细胞毒性T淋巴细胞通过Fas/FasL途经杀伤靶细胞［6］；通过阻断LIGHT与LTβR或HVEM/TR2 的相互作用而抑制LIGHT诱导的肝细胞坏死［7］；通过阻止Fas/FasL的相互作用抑制宿主细胞毒性T淋巴细胞的活化，从而减轻宿主细胞毒性T淋巴细胞对肝细胞的损伤。本研究结果证实各组大鼠术后第1天均出现ALT、TB升高，我们认为这与缺血再灌注及手术创伤有关。G4组大鼠术后出现ALT、TB再次升高及肝功能衰竭的时间明显推迟、生存时间显著延长，且其肝脏组织中有GFP表达。我们在以往的研究中已经证实重组AAV病毒中GFP与DcR3的表达是1致的，GFP的表达可以作为DcR3表达的标志［5］。
【
参考文献
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［5］王槐志，黎万玲，董家鸿，等.重组人DcR3腺相关病毒的构建和表达.免疫学杂志，2006,22
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