摘 要：以乐东拟单性木兰带腋芽茎段为外植体，探讨不同状态外植体和不同光照处理对污染率、褐化率及腋芽萌发和生长的影响。结果表明，无叶柄且经过7d暗处理的外植体腋芽萌发和生长状况最好。
关键字：乐东拟单性木兰;组织培养;腋芽;光照处理
1 材料与方法
1.1 试验材料
以乐东拟单性木兰带腋芽茎段为外植体材料，采自中南林业科技大学校园内成年乐东拟单性木兰植株的一年生枝条顶端。采集时间为晴朗无风的正午，采后立即进行处理与接种。
1.3 试验方法
采用MS培养基，蔗糖浓度为3%，琼脂浓度为7%，pH值5.8，添加6-BA 0.2mg/L，IBA 0.05mg/L。组培室室温25±2℃、光照强度2000～3000lx、光照培养周期12h/d（6：00～18：00）。接种后每周观察外植体情况，统计其污染率、褐化率、腋芽萌发率等。
1.4 统计方法
污染率（%）=（污染数/接种外植体数）×100
褐化率（%）=（褐化数/接种外植体数）×100
愈伤组织诱导率（%）=（产生愈伤组织的外植体数/接种外植体数）×100
芽诱导率（%）=（腋芽萌发的外植体数/接种外植体数）×100
2 结果与讨论
2.1 不同外植体状态和光照处理对外植体芽诱导的影响
本试验分别取带叶柄（叶柄在接种前用刀片切去但保留叶柄基部）和不带叶柄（叶柄已自然掉落）的带腋芽茎段，灭菌后接种于诱导培养基上，每组各接种40个，接种后分别进行7d的暗培养和正常光照，结果表明，外植体状态和光照培养条件对外植体启动有显著影响。
外植体的不同状态对外植体褐化率存在一定的影响，有叶柄状态的外植体褐化率较高。这可能是因为有叶柄的外植体在接种前被切伤，造成酚类物质溢出，从而褐化率增加。而暗处理对于降低褐化率没有明显效果，这与苏梦云[8]等对乐东拟单性木兰茎段褐化控制的研究结果一致。这可能是由于乐东拟单性木兰的外植体褐化对光照条件不敏感。有叶柄外植体由于接种前被切去部分叶柄形成伤口，愈伤率较高，在暗处理7d和正常光照条件下分别达到85%和70%，而无叶柄外植体由于无伤口，愈伤率为0。由于叶柄处的愈伤对腋芽形成有阻碍作用，有叶柄状态下的芽诱导率比无叶柄状态下的芽诱导率低。暗处理7d条件下的外植体腋芽萌发率比正常光照条件下要高。研究结果表明，选用无叶柄的外植体和经过暗处理7d有利于腋芽诱导率的提高。
2.2 不同处理对外植体芽诱导和生长的影响
不同外植体状态和不同光照处理对外植体腋芽的生长状况有较显著的影响。接种40d后，无叶柄外植体腋芽长势较壮，长度较大。接种70d后，无叶柄外植体腋芽长势较壮，叶片较长，比有叶柄外植体叶片长1～1.5cm;经过暗处理7d的外植体腋芽叶片舒展，而正常光照条件下的外植体腋芽叶片未完全展开。研究结果表明，经过7d暗处理的无叶柄外植体芽诱导率最高，出芽时间最短，芽和叶长势最好。
3 小结
本文以乐东拟单性木兰带腋芽茎段为研究对象，在外植体状态与光照处理对腋芽诱导的影响方面进行了研究。主要结论如下：
在腋芽诱导培养中，乐东拟单性木兰带腋芽茎段在接种过程中被切割叶柄，会造成愈伤组织形成，阻碍腋芽的萌发。不带叶柄的外植体由于叶柄已自然掉落，接种时不需要切割叶柄，不会造成对腋芽的伤害，也不会形成愈伤组织，从而更利于腋芽的萌发。经过7d暗处理的外植体褐化率较低，而腋芽诱导率较高。叶柄已自然掉落的乐东拟单性木兰带腋芽嫩茎在接种后进行暗处理，腋芽的诱导和生长状况较好。
（收稿：2014-11-17）
参考文献：
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[2]许小过，聂超仁，李鹏等.乐东拟单性木兰在武汉引种表现及园林应用[J].现代园艺，2013，（6）：19.
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